中国药典要求对细胞系进行检定，NMPA、FDA、EMA、世界卫生组织（WHO） 和人类用药注册技术要求协调国际会议（ICH）的各种法规文件概述了对细胞库检定的要求和指导，以确认细胞的起源和历史，并鉴定和测试细胞的身份，稳定性和纯度。

细胞检定主要包括几个方面：细胞鉴别、无菌检查、支原体检查、内外源病毒因子检查、成瘤性/致瘤性检查等。

细胞检测技术服务：

一、细胞鉴别试验

细胞培养及传代过程中可能产生的交叉污染在所有可能影响细胞质量的问题中是最难以被发现而且对后续研究影响最大的一种。使用被交叉污染而未被识别的细胞系即“错误”细胞系，在科研中会导致可疑的结果从而影响论文质量，而在临床应用及工业生产中，则会浪费大量的资源甚至危及人类健康。因此，近年来，高水平的科学期刊杂志都把细胞系的身份鉴定作为论文审阅的前提条件，而在临床应用及工业生产中，细胞系身份鉴定早已被写入药典的要求。

1、STR（短串联重复序列分析）鉴定

STR（短串联重复序列）分析法即通过提取样品 DNA，PCR 扩增 STR 位点， PCR 产物检测，检测结果分析，并与 ATCC 和 DSMZ 数据库进行比对，以确定样品种属来源，判断其是否存在其他人源细胞交叉污染。

2、种属鉴定PCR法 

通常情况下，对于非人源细胞，我们首先要解决的是交叉污染的问题，确保使用的细胞是所需要的单一来源的细胞。而解决的方法就是细胞的种属鉴定，目前常见的细胞种属鉴定方法有染色体分析、同工酶分析、DNA条码测序及PCR法等。这几种方法中，最常用、最普遍的为PCR法。

通常情况下，对于非人源细胞，我们首先要解决的是交叉污染的问题，确保使用的细胞是所需要的单一来源的细胞。而解决的方法就是细胞的种属鉴定，目前常见的细胞种属鉴定方法有染色体分析、同工酶分析、DNA条码测序及PCR法等。这几种方法中，最常用、最普遍的为PCR法。

方法一：针对常用种属的细胞（人、大鼠、小鼠），使用种属特异性的引物进行PCR扩增，用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测目的条带，来判断细胞的种属及是否存在不同种属来源的细胞交叉污染。

方法二：提取细胞DNA，用种属复合引物MIX对动物线粒体COXI基因扩增，然后用遗传分析仪对扩增产物进行毛细管电泳检测和分析。

种属鉴定结果判定一般包含两项：是否为单一种属来源细胞以及来源细胞种属。

二、染色体核型分析法

核型分析的结果可以确认样品的细胞系身份和来源物种。

染色体核型分析（包括但不限于）：中期染色体 G 显带分析和染色体计数（提供二倍体染色体数，频率分布和多倍体水平）。

三、同工酶鉴定试验法

对细胞乳酸脱氢酶（LD）、6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PD）和核苷磷酸化酶 （NP）三种酶分别进行凝胶电泳试验，并通过与指示细胞对比，确定有无交叉污染。

四、细菌、真菌污染检测

参考中国药典通则 1101，提供符合法规要求的薄膜过滤法和直接接种法。无菌检查均在 A 级隔离器或 C+A 级环境中进行，且在检测过程中持续进行环境监测。

适用性检查：均可按照法规的要求，对不同的供试品进行适用性试验。以确认所采用的方法适合供试品的无菌检查。

薄膜过滤法：采用封闭式薄膜过滤器，可过滤大量供试品以及利于解决供试品中可能存在微生物生长抑制剂等问题。是可过滤供试品首选的检测方法。

直接接种法：适用于无法用薄膜过滤法进行检测的供试品，包括混悬液等非澄清水溶液、固体供试品、非水溶性供试品和灭菌医疗器械等。

五、分枝杆菌检查

参考中国药典通则 1101，采用 Middlebrook 7H10 平板培养法，提供符合法规要求的分枝杆菌检查。检查均在A级隔离器或C+A级环境中进行，且在检测过程中持续进行环境监测。

六、支原体检查

参考中国药典通则 3301，提供符合法规要求的支原体检查包括培养法和指示细胞培养法（DNA 染色法）。

荧光法：供试品分别接种固体和液体培养基，于接种一周后取液体培养基转种进行次代培养，观察初代培养和次代培养结果。

PCR法：供试品接种于对照细胞，培养 3-5 天后传代再培养 3-5 天，于培养期末进行染色观察。

七、内外源病毒污染检查

检查细胞系/株中是否有来源物种中潜在的可传染的病毒，以及由于使用的原 材料或操作带入的外源性病毒。细胞进行病毒检查的种类及方法，须根据细胞种属来源、组织来源、细胞特性、传代历史、培养方法及过程等确定。 在您开展检测前，珈创愿意与您进行充分的沟通，确定合适的检测方案。

八、成瘤性检查

1、动物体内接种法（裸鼠）

2、软琼脂克隆形成试验

服务标准：